龍舌蘭可以使用的外植體有:
1.種子
2.花梗
3.幼芽
4.幼芽莖盤
5.葉片
其中1~4可以直接器官發生,不需要誘導瘀傷組織。
但是種子和花梗很難取得,幼芽和莖基盤必須破壞植株才能使用。
因此考慮到取得難易度和失敗風險,葉子瘀傷組織誘導是比較低風險的作法。
不過龍舌蘭的瘀傷組織差異很大,葉子誘導出的瘀傷組織比芽體瘀傷組織還要難分化,
依照品種不同,某些研究甚至無法從葉子瘀傷組織誘導出芽體,這是個隱憂。
莖盤和芽體誘導,會長出直接器官發生的芽或者瘀傷組織,莖盤的直接芽比較多,而他們的瘀傷組織可以用極高的成功率誘導成芽體,
葉子則只有0-70%的成功率,要用低生長素,高細胞分裂素的條件誘導,至少也要有1:2,1:3是下述研究的最佳結果
配方參考這篇論文
Chen, Y., Chen, X., Hu, F., Yang, H., Yue, L., Trigiano, R. N., & Cheng, Z. (. (2014). Micropropagation of Agave americana. HortScience horts, 49(3), 320-327. Retrieved Dec 27, 2023, from https://doi.org/10.21273/HORTSCI.49.3.320
0.5 mg NAA的效果較好,實際範圍應該可以在0.5~1之間嘗試。
低於0.1mg的話會死掉。
6BA的話在0.5mg~13mg都有效,不過在1mg左右效果比較好。
瘀傷組織會在3個月後直接發育成芽體,不需要更換配方。
不過其他研究更換配方之後會促進芽體發育,這方面可以嘗試看看。
這篇論文給出的最佳配方差不多是:
誘導瘀傷組織:1mg NAA + 1mg BA
誘導瘀傷組織發芽:1mg NAA + 3mg BA
繼代繁殖芽體:0mgNAA + 13mg BA
發根:0.3NAA+0.3IBA
naa發根效果不佳,要用iba
葉子根部的瘀傷組織誘導效果最好
葉基50~100%
中間38~80%
頂端25~50%
效果最好的介質是魔改MS,然後是1/2MS。
魔改MS是普通MS在另外加入論文作者自己的獨門配方,含有PH緩衝劑和一堆維他命。
如下:
250 mg·L−1 2-(N-morpholino) ethane sulfonic acid,
200 mg·L−1 左旋麩醯胺酸,
100 mg·L−1 肌醇,
100 mg·L−1 菸鹼酸, 吡哆醇、本多酸鈣, 硫胺、半胱胺酸
如果我要模仿的話應該就直接加一罐蠻牛進去吧,這麼多奇怪的維生素我也不知道要怎麼辦。
「蠻牛」含維他命C、牛磺酸、肌醇、本多酸鈣、離胺基酸、菸鹼醯胺、β胡蘿蔔素及維他命B群等
比較有問題的會是蘋果酸和碳酸,蠻牛畢竟是飲料裡面含有太多酸了。
還是丟一顆綜合維他命下去?